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序論:好文章的創作是一個不斷探索和完善的過程,我們為您推薦十篇動物醫學論文范例,希望它們能助您一臂之力,提升您的閱讀品質,帶來更深刻的閱讀感受。
2明確實習目標
2.1知識目標了解定期消毒制度的制訂、免疫制度的制訂、各階段動物的飼養管理、獸藥使用和保存管理、采血和收集糞便的方法、病料的采集和送檢、尸體的無害化處理、飼料倉庫防盜和防鼠防蟲措施、國家對種畜禽病種的檢測技術、環境保護措施。
2.2能力目標會正確進行免疫接種;會對動物進行臨床檢查;會對常見疾病進行臨床診療;能熟練對動物進行保定;會正確保存獸藥和使用獸藥;能對死亡動物進行尸體剖檢;能按要求進行病料的采集與送檢;能參與動物常見疾病的防控;會進行重要疾病的檢測;能對血、尿、糞進行常規檢驗;會動物進行產地檢疫;會熟練對動物進行采血;能配制洗手消毒液、霧化液消毒液、消毒池消毒液;會對病死動物進行生物安全處理。
2.3素質目標培養規范意識和質量意識;培養吃苦耐勞、愛崗敬業精神;樹立安全意識和環保意識;培養高度的責任心;具有良好的溝通能力和團隊協作精神;具有一定的創新意識。
3明確指導教師的職責
3.1校內實習指導教師的職責(1)在實習準備階段與企業兼職指導教師商定實習實施方案;(2)與企業兼職指導教師保持聯系與溝通,檢查實習開展情況;(3)解答學生實習過程中遇到的問題,指導學生撰寫實習報告;(4)學生學生思想動態,適時進行思想教育工作;(5)收集學生實習過程中的典型材料和異常情況,書面向系部匯報實習異常情況和違紀情況;(6)會同企業兼職指導教師對學生的實習進行考勤和辦理請假手續;(7)批改學生實習報告和上報實習成績。
3.2企業兼職指導教師的職責(1)負責實施實習計劃和方案,指導學生進行實踐操作,對學生進行實習鑒定和評價;(2)對學生進行職業道德、廠(場)規廠(場)紀、勞動紀律、生產安全、自救自護和心理健康等方面的教育,對學生進行崗位技能培訓,杜絕安全事故發生;(3)負責學生日常管理和教育,安排學生的住宿,為學生提供安全的住宿條件;(4)負責學生考勤、請假和外出管理工作,教育學生用水用電用氣安全。(5)保持與學校指導教師聯絡和溝通,向學校指導教師反映實習情況,提出合理化的建議
4制定實習考核與評價方法
實習考核由校外指導教師(企業兼職教師)和學校專業指導教師共同考核。校外指導教師考核以《實習鑒定表》中的總評為準,紀律表現和考勤情況由校外指導教師和學校專業指導教師共同完成,學生實習報告由校內指導老師負責批改。基本內容包括校外指導教師對學生在實際工作中所表現出的綜合專業素質的評價、學校專業指導教師對學生實習過程的綜合表現和專業素質的評價、學生實習報告三個方面,原則上分別由校外指導教師和學校專業指導教師按百分制打分、最后由學校專業指導教師按以下比例折合,得出實踐成績,實習考核成績按等級制和百分制記,分優秀、良好、及格、不及格。86-100分為優、76-85分為良、60(含)-75分為及格、60分以下為不合格。
5實習效果
經過企業實習的鍛煉,學生的獨立生活能力、與人相處的能力、職業素養和專業技能得到明顯的提高,有些學生在實習過程中也逐漸明確了自己以后的發展方向。
6存在的問題
6.1企業難聯系畜牧行業是個勞動密集型的行業,一般人認為不需要太多的技術就能把動物養好,還沒意識到畜牧業對高素質高技能人才的迫切需求。在實習安排中,往往是學校主動聯系企業,而企業很少主動聯系學校,且企業接收學生實習的出發點不一,有的是礙于孰人情面才接收學生,有的是因為生產人員不足才收學生以維持生產,有點是想通過實習提前接觸學生以便在招聘時取得先機,很少有企業把接收學生實習當成企業人員培養的一個組成部分。所以在安排學生實習時,往往是學校熱而企業不熱。
6.2實習點分散養殖企業有自身的特殊性,一個生產點的規模不會很大,所以一般只能接收5-10個,實習點很分散,這給實習安排和管理造成一定的困難。
1.1種質特性朱吉等[1]發現寧鄉豬經營養物質條件的改善及飼養科學的適應性變化,肢蹄臥系率降低92.2%,體尺體重性狀和繁殖性狀提高率分別達6.97%~27.67%、11.62%~17.44%,窩重提高率達26.91%~78.97%,特別是閹豬的生長速度和胴體性能明顯提高。寧鄉豬母豬日增重表現為前期低、中期高、后期下降的生長曲線,閹豬表現為前期高、中期低、后期回升的生長曲線,閹豬和母豬都具有生長肥育期日增重曲線的相似性。后備公豬的體重及體尺指標不及同齡母豬,主要是性成熟過早所致。
1.2肥育性能Rorz指出,改變日糧組成分與結構可以減少3.2%~62%的氮排出。寧鄉豬與瘦肉型豬氮的消化利用能力存在差異,寧鄉豬12.91%蛋白質日糧組具有較好的能氮平衡性。研究表明在寧鄉豬生長肥育后期添加一定量的半胱胺可促進生長、提高胴體瘦肉率和改善豬肉品質。寧鄉豬雜交組合具有較高的生長速度和胴體品質。寧鄉豬生長肥育性能的可塑性較強,閹公豬的生長肥育性能優于母豬,優化飼糧是提高其肥育性能的基礎。寧鄉豬肥育期日增重與膘厚、肥育率呈正相關;胴體長與胴體寬、后腿重與腿臀圍呈強正相關,與肥肉率呈弱正相關,與瘦肉率呈弱負相關;眼肌面積與瘦肉率呈弱負相關,而與肥肉率呈弱正相關。最近研究表明由于寧鄉豬肥膘產量高,相對產值較低,所以55~85kg階段是寧鄉豬的最佳屠宰期。
1.3母豬營養需要研究表明寧鄉豬母豬妊娠前期、妊娠后期和哺乳期能源分別為37%~39%、22%~24%和39%~41%,相應的日攝食標準消化能分別為18.9MJ、27.0MJ和45.5MJ,粗蛋白質分別為156g、242g、538g;提高母豬哺乳期采食量是節省能量、提高仔豬增重的重要途徑,補飼青料可提高母豬的飼料利用率。近期研究表明14%以上的日糧蛋白水平有利于促進寧鄉豬母豬的生長發育。
2生理、生化指標
研究表明寧鄉豬白細胞總數、紅細胞體積、淋巴細胞計數及血小板均低于三元豬;甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白與血清甲狀腺素T3含量高于三元豬,血清甲狀腺素T4和胰高血糖素含量下限值低于、上限值高于三元豬,血清葡萄糖含量低于三元豬可能與胰島素含量高于、胰高血糖素低于三元豬有關。與近交系五指山小型豬、廣西巴馬豬和貴州小型豬等國內小型豬相比,寧鄉豬的堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶、低密度脂蛋白-膽固醇和總膽固醇較高,而γ-谷氨酰轉移酶、三酰甘油、肌酐和高密度脂蛋白-膽固醇較低;與杜洛克豬、長白豬、大約克夏豬等國外引進品種豬相比,寧鄉豬的丙氨酸氨基轉移酶、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶明顯較高,總膽固醇明顯較低,γ-谷氨酰轉移酶、總蛋白、白蛋白、尿素氮、葡萄糖相差不大[9]。郭潔平等[10]研究發現與長白豬相比,寧鄉豬血清精氨酸、一氧化氮濃度較低,空腸前段和肝臟一氧化氮合成酶活性較高,腎臟中的一氧化氮合成酶活性最低,腸道和肝臟中N-乙酰谷氨酸合成酶mRNA表達水平最高。
3病理特性
研究發現豬流感(H3)誘發寧鄉豬高熱病病理變化主要在呼吸器官,表現為氣管、支氣管充血,肺腫大,小葉間質增寬,肺尖葉有實質病變,腸胃出現卡他炎癥、彌漫性出血。外來良種豬及其三元雜交、二元雜交生豬發病嚴重,死亡率高,寧鄉豬及其與外來良種豬的雜交后病癥狀較輕,治療也容易一些,有的生豬甚至不治而康復,死亡率也相對較低。
4肉質性狀
寧鄉豬肌纖維纖細,紋理間脂肪分布豐富均勻,肉質細嫩,肉味鮮美,是北京奧運會唯一指定豬肉產品。根據營養需要推薦飼養標準配制日糧,測定肌肉常規成分、氨基酸、脂肪酸和礦物元素,發現寧鄉豬肌肉內脂肪為5.37%,風味氨基酸高達220.5%,必需氨基酸高達122.4%,油酸(18:1)51.0%,亞油酸(18:2)7.74%,不飽和脂肪酸59.6%,是與深海魚油媲美的保健食品。寧鄉豬和三元豬鮮味氨基酸、必需氨基酸和氨基酸總量差異不顯著。目前開展了寧鄉豬與商品瘦肉型豬生長激素基因功能比較研究,王文策等選用了融合表達載體構建寧鄉豬生長激素的原核表達質粒,成功構建重組原核表達質粒pET-GH。
5遺傳學特性
研究發現寧鄉豬二、四、六月齡時體重變異系數均在16.28%以上,體長、胸圍、腿臀圍變異系數為5.66%~8.55%。寧鄉豬的體長與胸圍的遺傳相關系數為0.43,表型相關系數為0.74,這與寧鄉豬屬于脂防型豬種、具有邊長邊肥的特點有關。寧鄉豬頭長、額寬、腿臀圍、體高具有高遺傳力,頭長、額寬表型變量受環境偏差的影響較小。寧鄉豬的變異系數較小,產仔數、產活仔數、初生重、泌乳力、斷奶重等性狀的變異系數較大。寧鄉豬毛色是品種特征和遺傳穩定性的標志;與瘦肉量相關系數最高的是后腿重。研究發現TLR6基因片段MspI酶切位點的兩種等位基因T/C的頻率分別為0.186/0.814,TT基因型個體顯著影響4月齡體質量性狀,TT基因型4月齡體質量比CC型高25.92%;TT基因型個體顯著影響45日齡體質量、6月齡體質量、體長和胸圍性狀,TT基因型45日齡體質量比CC型高12.46%,結果提示寧鄉豬TLR6基因不同基因型對生長性狀有著重要的影響,是寧鄉豬育種應用中的一個潛在遺傳標記[15]。
6實驗寧鄉豬在生物醫學研究領域中的應用
6.1實驗寧鄉豬應用于醫學研究的優點研究顯示靈長類、犬、貓等在動物實驗研究中受到倫理限制,而豬被認為是研究人類疾病最合適的實驗動物。既經濟實用,又克服了同種器官的短缺。豬心血管系統的解剖、生理特征和對致動脈粥樣硬化食物的反應與人類高度一致,成為心血管疾病研究的標準模型動物;豬腎臟的解剖和生理功能幾乎是人類的復制品;豬也是皮膚和整形外科手術、皮膚燒傷等較理想的模型動物;小型豬還是皮膚黑色素瘤研究的首選實驗動物。剛出生的或剖腹產得到的仔豬,是進行抗原抗體反應很好的模型動物,小型豬也是人類異種移植理想的組織、器官來源,可作為異種移植排斥反應的模型。
6.2實驗寧鄉豬在生物醫學研究中的應用最近研究發現原代寧鄉豬與其第一代仔豬13項血液生理指標如白細胞、紅細胞、血紅蛋白、紅細胞積壓及部分血液生化指標如總膽紅素、尿素氮、總蛋白等有顯著性差異,為寧鄉豬實驗動物化研究提供了參考數據。研究發現寧鄉豬與人N-乙酰谷氨酸合成酶氨基酸序列同源性高達93.2%,與小鼠同源性達90.76%,為內源性精氨酸的營養調節提供一個新的途徑。趙拴平等發現寧鄉豬的總蛋白、三酰甘油、尿素氮、葡萄糖等血液生化指標都處于人參考值范圍內,堿性磷酸酶、總膽固醇均高于人參考值范圍。耿梅梅等還發現,門靜脈灌注葡萄糖可使寧鄉豬血糖短期升高,白蛋白、低密度脂蛋白及α-淀粉酶活性下降,經機體代謝,上述指標逐漸恢復,但尿素氮、高密度脂蛋白、堿性磷酸酶和乳酸脫氫酶的活性基本無變化。研究還發現寧鄉豬與瘦肉型豬相比有不同的代謝,包括脂肪生成、脂質過氧化、能源利用和分區、蛋白質和氨基酸代謝、胃腸道微生物的發酵,肥胖寧鄉豬可能是兒童肥胖研究的有用模型,也可能是研究動脈粥樣硬化、糖尿病有利模型。寧鄉豬完整線粒體基因組序列為有關遺傳機制的進一步研究提供重要數據,但研究還表明寧鄉豬可能不宜作為異種移植的適當供體。
2、AP-PCR的技術方法和優缺點
2.1模板DNA提取和質量檢測
模板DNA提取的方法有很多,應根據組織的不同和試驗需要確定,但其基本的原理相同,都是通過酶或有機試劑裂解組織使核酸游離出來,然后通過有機溶劑或吸附柱純化后提取。核酸的濃度和質量可通過UV分光光度計讀取D260nm與D280nm的比值和1%瓊脂糖凝膠電泳等檢測來確定(Mohini等,2011)。目前已有很多商品化的核酸提取試劑盒可供選擇,使用方便并可得到較高質量的模板(DNA或cDNA)。
2.2隨機引物的選擇
隨機引物長度通常為10個堿基,GC的含量為60%~80%的寡聚核苷酸鏈,隨機引物不僅核苷酸的排列順序是隨機的,而且所有引物的序列無直接相關性(韋莉萍,2001)。理論上,如果1條隨機引物反應可產生x個獨立的條帶,那么a條隨機引物同時參與反應就可得到xa2個條帶,但多條引物同時參與反應會相應的增加結果的復雜性和不穩定性(Nandani等,2014)。隨機引物雖然可用于所有物種,但并不是所有的隨機引物擴增出來的結果都有意義,想要得到較為理想的結果仍需根據研究對象和研究目的進行引物的篩選和反應條件的優化,一般來說選擇能產生中等復雜度的圖譜的引物(Nandani等,2014)。
2.3AP-PCR擴增條件
AP-PCR也包括變性、退火、延伸的經典PCR過程。變性過程在94℃進行,一般來說預變性3~5min;退火溫度在35~38℃,也可根據引物Tm值來確定,一般退火溫度比引物Tm值低3~5℃;延伸溫度在72℃,在此溫度下Taq酶的合成效率約為2000bp/min(Kumari等,2013)。AP-PCR的試驗條件、模板的質量和濃度及反應體系中Mg2+的濃度等都可能對擴增的結果產生影響,想要得到較為理想的試驗結果,反應體系的優化和試驗操作的標準化是非常重要的(Mohini等,2011;Kumari等,2013;Babu等,2014)。
2.4AP-PCR的優點
AP-PCR延續了PCR的效率高、靈敏度高、樣品用量少等優點,同時又兼有自身的優點:①不同種類的生物樣品即可使用通用的隨機引物進行基因分析(Welsh等,1991);②可在對研究對象不了解的情況下進行基因多態性分析,從而對研究對象進行遺傳分析和分類研究(Williams等,1990;Welsh等,1991);③對于研究對象DNA樣品量有限的情況也適用(Nandani等,2014);④隨機引物易獲得,試驗成本低,技術容易掌握,除此之外,可對AP-PCR產生的基因條帶進行純化和克隆,以便進一步分析(Ge等,2014)。
2.5AP-PCR的局限性
AP-PCR雖然具有很多獨特的優勢,但目前仍處于應用的探索階段,其本身仍有局限性:①AP-PCR技術通常是對顯性基因標記進行分析,這就意味著不能將純合子與雜合子區別開(Babu等,2014);②由于無明確的目的序列,如果發生擴增條帶的缺失就無法得知是什么原因導致的,不利于對擴增結果的分析(Kumari等,2013);③AP-PCR的結果分析需要專業的帶譜分析知識,否則很難從結果中得到有意義的信息;④AP-PCR結果的重復性問題一直是限制其廣泛應用的主要原因,由于其結果受DNA模板的質量、反應體系成分和反應條件的變化等因素的影響,其擴增產物的穩定性難以控制(Mohini等,2011);⑤AP-PCR結果通過凝膠電泳來觀察,但遷移率相同的譜帶的核苷酸同源型不明等情形易造成干擾,有時電泳遷移率相同的片段并非同源,這就給結果分析帶來很多不確定性(Nandani等,2014)。
3、AP-PCR技術研究進展
3.1AP-PCR技術自身的優化
近年來,不斷有研究者對AP-PCR技術進行改進和優化,使其更具可操作性、實用性和更廣泛的應用領域。劉剛等(2004)對AP-PCR進行了優化,建立了多重隨機引物PCR(M-RAPD)技術,M-RAPD通過使用3條組合的隨機引物在較高的退火溫度下對肺炎鏈球菌、糞腸球菌和大腸埃希菌耐藥菌株等的染色體DNA進行擴增獲得了穩定的種株特異性的DNA指紋圖,其所提供的基因信息要遠多于傳統的RAPD技術。Xiong等(2012)對AP-PCR進行了反應程序優化和隨機引物中G/(G+C)不同比例研究,結果表明,反應程序中從退火步驟到延伸步驟的時間延長,溫度變化由3℃/s下降到0.3℃/s時,PCR產物條帶明顯增加,這可能是由于延長溫度變化的時間可提高引物與模板結合的穩定性(Fu等,2000),在比較了隨機引物中G/(G+C)不同比例的PCR產物后發現,當G/(G+C)比例在0.7時PCR產物的條帶最多,也更適用于進行AP-PCR反應,因此反應程序的溫度變化和隨機引物中G/(G+C)的比例可能也是影響AP-PCR結果的重要因素。Zou等(2003)報道了利用兩步AP-PCR方法在微量DNA樣品中擴增未知序列DNA并進行克隆。第1步PCR利用29個核苷酸序列的引物進行擴增,Ran5-29(5′-GTTCTACACGAGTCACTGCA-GNNNNNNNTGGC-3′),這一隨機引物包括21個已知核苷酸序列部分,7個隨機核苷酸序列和1個3′端TGGC的卡子結構,在隨機序列前6個核苷酸序列構成了1個PstⅠ位點,其中3′端卡子結構在退火時可與含有GCCA位點結合,保證了隨機序列可與GCCA上游的序列匹配,3′端TGGC的卡子結構可使引物與模板的匹配數增加7~11個核苷酸,PstⅠ位點決定PCR產物的長度,并保留1個黏性末端,保證了克隆的順利進行。第2步PCR使用可與Ran5-29相匹配的19個核苷酸的Fix5-29(5′-GTTCTACACGAGTCACTGC-3′)作為引物,獲得的產物進行純化、克隆分析。結果表明這種策略可檢測臨床樣本DNA的最小量在1pg,克隆靈敏度達到100fg目的DNA模板。這種方法較普通AP-PCR靈敏度更高,適用于樣本量極少的臨床樣品檢測。Clem等(2007)在對比了AP-PCR方法的不同擴增策略,在此基礎上建立一種快速有效的檢測不明病原的多重隨機RT-PCR方法。在對血液樣本進行過濾后加入了DNase和RNase消化,利用宿主基因對DNase和RNase敏感而衣殼保護的病毒對其不敏感的特點,去除宿主自身基因的污染。其利用單一十聚核苷酸為引物,引物序列為(V8A2)5′-VVVVVVVVAA-3′,V=A、G或C,3′2個A提供了一個“lock”結構,引物中不含有胸腺嘧啶脫氧核苷酸(T)可避免發生引物二聚體,但這一結構不可避免的會影響引物與模板的結合。試驗結果一旦監測到病毒的擴增產物即可通過鳥槍法克隆測序鑒定。這一方法對病毒的出現或重組進行快速監測和鑒定有很強的實用性,其檢測靈敏度達到1000克隆/mL,應用這一技術成功從血液樣品中檢測并獲得了3種獨立病毒的部分序列。
3.2以AP-PCR為基礎衍生的分子生物學技術
隨著分子生物學技術的發展,單一的AP-PCR技術已不能滿足研究的需要,因此為了克服AP-PCR的一些缺點在其基礎上衍生出包括非序列依賴單引物PCR(SISPA)、簡并核苷酸引物PCR(DOP-PCR)、DNA擴增指紋印記(DAF)、微衛星引物PCR(MP-PCR)等分子生物學技術。SISPA方法最早是由Reyes等(1991)建立起來的,其以AP-PCR為基礎,非對稱的單一引物與DNA模板的鈍末端直接連接,隨后經過若干循環的變性、退火和延伸后,模板的數量得到擴增,后經克隆、測序、分析得到基因序列。Breitbart等(2005)在SISPA的基礎上建立了DNase-SISPA聯用的方法,增加了樣品過濾和DNA酶消化等步驟,成功的從人的血液臨床樣品中發現了新的病毒基因。Djikeng等(2008)在已有研究基礎上進行了新的改進,在樣品的處理中加入RNase酶以清除外源RNA的污染如核糖體RNAs。針對有polyA尾的病毒,在反轉錄過程中加入六聚核苷酸隨機引物5′端加入一段病毒特異性引物序列,形成結合引物(FR26RV-N:5′-GCCGGAGCTCTGCAGATATC-NNNNNN-3′),同時加入連接polyT的引物(FR40RV-T:5′-GCCGGAGCTCTGCAGATATC-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-3′)以增加對病毒基因3′端的覆蓋率。這種在六聚體隨機引物連接一保守序列即病毒特異性引物,可增加對病毒基因5′的捕獲,從而使SISPA的成功率大大提高。DOP-PCR技術是在AP-PCR基礎上建立起來,其引物(DOP-ORI-Xho)由22個核苷酸組成,3′和5′端的特異核苷酸序列和中間的6個核苷酸構成的隨機引物組成(Telenius等,1992)。由于隨機引物的簡并性,每個反應包含著數以千對的引物。DOP-PCR的反應程序包含2個不同的部分,前5個循環引物的3′端至少有12個連續的核苷酸與模板DNA相結合,對引物和模板的匹配度要求不高,在隨后的30~40個循環里,擴增錯配的幾率會逐漸降低。初始反應產物將成為模板,用相同的引物進行擴增,擴增產物通過克隆測序即可獲得基因序列(韓燾等,2013)。Csaba等(2002)打破了DOP-PCR只用同一種引物的傳統,嘗試了5條新的可用于反應的引物,使反應時間由原來的7~8h縮短為2h,縮短了變性過程的時間,在取得理想結果的同時,減少了擴增酶的用量,提高了DOP-PCR的效率和實用性。DAF是一種改進的AP-PCR分析技術,與AP-PCR技術不同的是,DAF使用的引物濃度更高,長度更短(約5~8個堿基),在PCR反應上只包含2個溫度的循環,省去了延伸的步驟,使用聚丙烯酰胺凝膠電泳,通過銀染方法觀察結果。DAF通常會產生非常復雜的帶型,因此它所提供的譜帶信息也比AP-PCR大得多(Caetano-Anolles等,1993)。Al-hag等(2007)應用DAF鑒定8株細胞系,研究結果表明,DAF可產生穩定的可供區分的PCR譜帶。Ehsan等(2011)應用DAF技術對分離到的25株牛隱孢子蟲進行亞型的鑒定,結果發現分離的25個蟲株分屬于為3個不同的亞型。MP-PCR是以AP-PCR為基礎的分子標記技術。Ma等(1996)發現真核生物基因組中存在短串聯重復序列,又稱微衛星DNA或簡單重復序列(simplesequencerepeats,SSR)。真核生物基因組中SSR的分布是隨機的,大約每隔10~50kb就有1個SSR。SSR位點最常見是雙核苷酸重復,即(CA)n和(TG)n,每個微衛星DNA的核心序列結構相同,重復單位數目10~60個。MP-PCR的引物是與SSR位點互補的二聚或三聚核苷酸重復序列,如其引物序列可是(TA)10或(CGA)6,擴增的是SSR之間不同長度的DNA序列,將擴增產物進行凝膠電泳,根據分離片段的大小決定基因型并計算等位基因頻率(Dawson等,2013)。MP-PCR克服了AP-PCR引物的不確定性,增加了PCR產物譜帶的穩定性和針對性,該技術也已廣泛應用于物種分子標記、基因圖譜繪制和基因差異性分析等方面(Tian等,2014;Ding等,2014;Wei等,2014)。
3.3AP-PCR與其他分子生物學技術的聯用
擴增片段長度多態性(AFLP)技術是將基因組DNA先用限制性內切酶切割,然后將雙鏈接頭連接到DN段的末端,接頭序列和相鄰的限制性位點序列,作為引物結合位點(Rikalainen,2013)。針對AP-PCR結果譜帶核苷酸同源性無法確定的缺點,Tan等(2011)將AP-PCR與AFLP進行聯用,利用2種方法各自的優勢,在對可能含有未知病原的臨床樣品進行檢測,以實驗室確診的登革1型病毒為陽性對照,首先用AP-PCR對有限的樣品基因進行隨機擴增,然后使用AFLP技術對進行擴增從而得到樣品穩定的DNA多態性標記。此方法克服了AP-PCR的同源性不明問題,同時比單獨使用的AFLP方法進行檢測的靈敏度提高100倍,在臨床樣品的檢測中有很大的實用價值。高通量的測序技術也被稱為下一代的測序技術,其與AP-PCR技術的配合使用,讓AP-PCR有了更廣闊的應用前景。Hang等(2012)首先使用錨定隨機引物P17N8(5′-GTTTCCCAGTAGGTCT-CNNNNNNNN-3′)進行RNA反轉錄,在通過錨定隨機引物P17N8和P21(5′-CGCCGTTTCCCAG-TAGGTCTC-3′)同時進行AP-PCR擴增,再通過高通量的測序技術對PCR產物進行測序,對得到的基因序列進行拼接處理,從而得到了奧羅普切病毒和卡拉帕魯病毒L片段完整基因序列。vanderHeij-den等(2012)利用序列非依賴性病毒基因片段擴增方法與Roche-454測序技術聯用,成功的從患急性肝炎病犬的肝臟組織檢測出犬Ⅰ型腺病毒基因,研究結果表明AP-PCR技術和下一代的測序技術聯合使用的方法在獲得病毒完整基因序列和檢測病原等方面的實用性。
4、AP-PCR技術在動物醫學中的應用
4.1在傳染病流行病學和病原遺傳學分類中的應用AP-PCR由于其獨特的技術優勢,在獸醫傳染病學和病原遺傳學分類中已得到廣泛應用。Leh-marn等(1992)用此技術對念珠菌屬的分離菌進行分析,試驗結果表明,同一菌種的不同菌型間呈現出DNA長度的多態性;此帶型圖在同一菌種的不同菌型間,其相似程度遠大于不同種的菌株,這也說明每種菌的隨機引物PCR帶型極具特征性。Louie等(1996)用2種引物檢查15株李斯特單核菌相關流行分離株和36株不相關流行分離株。經擴增后的帶型分析,將其分為9個型,每個型中又分有不同的亞型。Zadoks等(2000)在牛乳樣品中分離到23株金黃色葡萄球菌,經AP-PCR鑒定1~8株屬于Ⅰ型菌,9~20株屬于Ⅱ型菌,其余3株分別屬于Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型菌。Butler等(2001)應用該技術對3次牛霉形體暴發流行菌株進行了檢測,結果表明,發生在其中2個養牛場的流行病原菌具有一致的指紋圖,引而具有相同的感染來源,而在另一牛場分離的菌株間則顯示了指紋圖譜的顯著異型性,說明它們具有多個感染來源。王雪敏等(2011)利用多組隨機引物對副雞禽桿菌10個國際標準株、血清C型疫苗株和4個國內分離株進行AP-PCR擴增,結果顯示,所有菌株可分為11個譜型,聚為4類。劃分的11個譜型可和現有分型方法中的不同亞型一一對應,提示這種方法可區分不同血清亞型。AP-PCR作為寄生蟲遺傳學分類鑒定的方法已得到廣泛應用,克服了傳統分類方法難以解決的問題。Macph-eson等(1993)應用AP-PCR技術區分來自不同宿主的7種艾美爾球蟲,結果表明選擇合適的引物可對7種球蟲進行鑒別。張偉信等(2003)應用該技術對雞柔嫩艾美耳球蟲不同地理株的多態性研究,結果表明不同地理株間及同一地理株親代與子代間均存在DNA多態性差異,其中不同地理株間種內變異程度較大,同一地理株子代與親代間也發生遺傳變異,但變異程度較小。
4.2在病原差異基因分析中的應用
AP-PCR技術進行RNA指紋圖譜分析不僅能鑒定基因的表達差異,而且能顯示低水平表達的基因差異。Nicho-las(2000)應用此方法鑒定了絲裂霉素C誘導下鼠傷寒沙門氏菌SOS調控基因表達的差異,結果表明,絲裂霉素C誘導后21條基因譜帶出現表達水平的上調,其中20個基因片段對應的是可辨識的基因序列,15個基因序列與數據庫中基因序列無同源性,被確定為新的表達序列,6個基因片段與SOS基因編碼的調控蛋白有關。Diana等(2005)應用AP-PCR技術對芐硝唑作用下克氏錐蟲基因表達差異多態性的研究,結果發現對芐硝唑敏感和對芐硝唑抵抗種群之間系統指紋圖譜存在一定的差異,其中可能存在克氏錐蟲對芐硝唑擁有抗性的表達機制,雖然抗性種群在芐硝唑作用下系統指紋圖譜沒有明顯的變化,但敏感種群間的系統指紋圖譜卻有著明顯的變化。AP-PCR技術為鑒定基因差異提供了一種快速有效的方法。
4.3在未知病原檢測中的應用
病原微生物引起的動物疫病呈現出復雜性和非典型性等特征,普通的臨床診斷方法很難確定病原的種類,這種情況下使用傳統PCR方法檢測臨床樣品的效率不高,而且存在漏檢可能。AP-PCR技術提供了一個更為全面、快速和靈活的檢測方法,對病原微生物進行全基因組的檢測(姚四新等,2010)。Djikeng等(2008)使用DNase-SISPA技術在牛的血清中分離到牛鼻病毒基因。Clem等(2007)利用改進的AP-PCR方法,從血液樣品中檢測并獲得了3種獨立病毒的部分序列,即腺病毒17、卡薩奇病毒A7和呼吸道合包體病毒B。周斌等(2004)在研究鴨病毒性肝炎病毒時,發現其種毒可能受到污染,隨后挑選4條隨機引物對其進行反轉錄PCR擴增,共擴增出3條基因片段。克隆測序的結果表明,與禽腺病毒(雞胚致死孤兒病毒)基因組部分序列同源性分別高達99.5%、99.6%和99.5%,從而確定了鴨病毒性肝炎病毒雞胚尿囊液種毒受到禽腺病毒的污染。黃欣梅等(2011)采用DNase-SISPA對導致鴨、鵝產蛋下降的病原基因進行擴增,并在此基礎上設計了1對特異性引物成功的擴增出新型鵝黃病毒JS804毒株基因。
在人教版初中語文教材七年級(下)的第六單元,收錄了包括馮驥才的《珍珠鳥》、沈石溪《斑羚飛渡》、牛漢的《華南虎》、布封的《馬》和蒲松齡的《狼》在內的5篇“動物小說”。5位作家分別從不同角度出發,描寫了狼、虎、馬、羚羊等動物各自的世界與生活,為學生帶來了與人類社會不同的屬于動物世界的情感與倫理道德。
筆者認為,將動物小說收錄進初中語文教材,這與作品中浸透著的審美價值和人文內涵,以及學生從中可以收獲的情感體驗是分不開的。本文謹以“中國動物小說大王”沈石溪的《斑羚飛渡》為例,試從文本解析、作品價值和人文內涵這三方面出發,簡要論述“動物小說”對中學語文教育所具有的價值與意義。
1 “動物小說”概念闡釋
可以說,“動物小說”這一概念,是本論文中出現的中心概念。對這一概念做一個清晰的闡釋,對于本論文的展開具有至關重要的作用。筆者在整理了現有的研究資料之后發現,“動物小說”的概念可分三個層次去理解:
首先,“動物小說”是一種獨特的藝術體裁形式。其特點在于它是以動物為主要描寫對象,形象地描繪動物世界的生活、各種動物尋食、求偶、避難、御敵的情態、技能,動物在大自然中的命運、遭遇及動物間的關系,動物與人類的接觸等,從中尋覓大自然的奧秘與情趣,給人類以有益的啟示與享受。
其次,在中國文學的長廊中,有無數作品以動物為主角,但是,并非所有以動物為主人翁的文學作品都是“動物小說”,那些把不同種類的動物當作人類社會道德觀念的形象符號,或當作不同類型人物的化身,讓動物進入人類的生活形態,讓動物開口說話,僅僅把動物自身的生活形態和行為動作當作點綴或趣味,這一類作品或可稱為寓言或可稱童話。而那些實錄性作品,雖然是以動物為主人翁,著力描繪動物的生活形態和行為動作,其中也不乏有精彩的心理描寫,但總體上說,是以知識性和趣味性見長,基本上都是站在人類的敘述角度對動物進行外部觀察和命運追溯,就分類而言劃入動物故事或動物傳記文學更為妥當。
再者,本文所指涉的“動物小說”是指,以動物為主人翁展開故事建構,在故事情節和動物行為基本真實的基礎上不拘泥于個別動物的心理感受和思維稍稍逸出物種局限的,滲透著作家對人生、對命運等問題思考的兼有文學性與藝術性的文學作品。
2沈石溪及其《斑羚飛渡》
有著“中國動物小說大王”之稱的沈石溪,原名沈一鳴,1952年生于上海,祖籍浙江慈溪。1969年初中畢業赴西雙版納插隊,在云南邊疆生活了十八年。創作以動物小說為主,已出版作品五百多萬字,代表作有《狼王夢》《第七條獵狗》《雙面獵犬》《一只獵雕的遭遇》等。現為中國作家協會兒童文學委員會委員、上海作家協會理事。曾獲得中國作家協會全國優秀兒童文學獎、中國圖書獎、冰心兒童文學新作獎大獎、臺灣楊喚兒童文學獎等多種獎項。
一直來,沈石溪的動物小說都深受學生及成年讀者的歡迎。從多年的初中語文教學實踐中,筆者發現,非常多的學生通過閱讀沈石溪的動物小說獲得了心靈上的洗禮。究其原因,筆者認為首先在于沈石溪的動物小說引起了學生聽故事的興趣,作家深情詮釋的動物形象深深感染著他們純真的內心,驚險刺激的動物故事牽動著稚嫩的神經,從而培養了學生關心熱愛動物的責任心和面對死亡的勇氣;其次,在作家筆尖緩緩流淌的文字如同催化劑一般促使學生去思考弱肉強食的叢林法則,去體會動物們的悲歡離合、喜怒哀樂在無情的叢林法則面前是多么渺小與微不足道,就好像,與手持獵槍的人類比起來,哪怕是再兇狠的動物都是無助與無奈的,沈石溪動物小說直接激起了學生對人性、道德、生命、命運等問題的思考,對人與動物、人與自然和諧共生關系的關注。好幾次在講解作品《斑羚飛渡》時,筆者都曾深深被學生們所流露出來的真情所打動。
作為課堂教育的直接對象,學生對語文作品的接受與反饋程度,是檢驗一部作品、一堂課甚至是一位初中語文教師最好的指標,從沈石溪的《斑羚飛渡》中,筆者感受到了語文課本的魅力和課堂教育的價值所在。這是與該小說本身所具有的深刻內涵分不開的。具體而言,《斑羚飛渡》這部作品所具有的內涵包括以下兩個方面:
(1)自然生態內涵。《斑羚飛渡》一文描寫了一群被逼至絕境的斑羚,為贏得種群的生存機會,不惜用犧牲一半挽救另一半的方法來擺脫困境。從作家動人的描寫中,學生可以了解到動物在自然中生存的法則和羚羊的生存現狀。用犧牲一半來挽救另一半羚羊的辦法,可以說是這個物種在不斷進化的過程中總結出來的“生存竅門”,其中蘊含著一定的自然生態法則。學生通過對作品的解讀,可以了解到動物世界不同于人類世界的生存、繁衍、進化法則,對于他們而言,不僅可以從中收獲相關的專業知識,還可以了解更多與這個大自然息息相關的生態知識。從這個方面而言,《斑羚飛渡》是一部具有自然生態內涵的作品。
(2)人文內涵。人文內涵是《斑羚飛渡》真正打動學生的關鍵所在,也是作家作品之所以如此具有魅力的原因所在。作品中,斑羚在危難中所表現出來的智慧、勇氣和自我犧牲精神,展示了處于個體利益與家庭(族群)利益沖突中的動物們毅然以家庭(族群)利益為先的氣魄。當一只年老體弱的羚羊,以自己的犧牲來獲得另一只年輕羚羊的生機,這種以家庭、集體利益為先的行為具有深刻的美學內涵,體現出了悲劇(悲壯美),而學生們之所以在課堂上能從作品中獲得心靈的洗禮,也正是因為該作品本身所具有的深刻的人文內涵。
進入初中的學生,他們的心智相較于小學階段有了進一步的提升,也有了進一步成熟的趨勢,因此這個階段的語文教學,更應該承擔起樹立學生能夠欣賞甚至是享受語文作品,從作品中獲得心靈的陶冶進而引導他們往更加健康的方向發展的任務。但同時也不能忽略了作品本身文學性因素的剖析,讓他們在作品中獲得文學的熏陶,感受語言的魅力。
3動物小說對中學語文教育的意義
在上文的論述中,筆者簡要闡述了沈石溪《斑羚飛渡》的內涵價值,而縱觀人教版初中語文教材七年級(下)的第六單元所收錄的這5部動物小說作品,就可以發現它們都是以不同動物形象為主人公的作品,它們的出現可以為初中語文教育帶來怎樣的意義呢?
首先,令中學語文課本的作品形式更加豐富。在論文的第一部分,筆者已經闡釋了“動物小說”的定義,而將以動物的喜怒哀樂為主要表現內容的作品帶入中學語文的課堂,可以大大豐富整個課本的作品形式,令學生可以接觸到更多類型的語文作品,培養他們對不同類型作品的鑒賞能力,尤其是在豐富學生的想象力、提升他們的審美感受能力等方面具有重要作用。
其次,令學生可以從課本中感受到文學的博大精深,提升他們對作家作品的學習興趣。如果中學課本中,所有作品都是以人類形象為主人公的話,那么學生便不能更加全面、豐富、多元的感受到文學的立體性、深厚,同時也不利于鍛煉學生的語言表達能力、闡釋能力和想象能力,一定程度上就有損語文教育的價值與意義。
第三,有利于開發中學生的情感世界,尤其是對動物世界的關注與同情。隨著人類文明的不斷發展,人們容易陷入一個誤區,那就是人類才是這個世界的主宰者,大自然的生態圈要緊緊圍繞人類為中心進行運轉。但其實,這是一個錯誤的認識。中學生作為一個心智并未完全成熟,人生觀、世界觀、價值觀正在形成過程中的群體,他們應該更多元地接觸大自然,更豐富地去了解這個世界的斑斕美麗,而將動物小說帶入中學語文課堂,不僅僅可以讓中學生了解到動物與人類在自然中應該是平等的,動物同我們人類一樣,有著友情、愛情、親情的需要,它們的生存現狀是與我們的生態文明緊密相關的,我們應該更多的對它們加以關注與照顧。通過課堂上對動物小說的學習,可以陶冶中學生們的情操,在他們心中播撒關愛、平等與尊重的意識,進而令他們更好的與人、與動物、與自然和諧相處。筆者認為,這將是動物小說進入中學課堂最重要的價值所在。
4結語
“動物小說”作品進入人教版初中語文教材,筆者認為這絕不會是偶然。多年的教學實踐,讓筆者不斷地從這些作品中發現新的可供與學生交流、學習的知識,“動物小說”為中學語文教學帶來的價值和意義是巨大的,是不可忽視的。它不僅讓學生感受了文學、文字的魅力,也讓學生們獲得了更多對動物世界、自然世界的了解和認識,有利于培養學生的人格品質,因此,筆者認為如何更深入地挖掘這些“動物小說”中的深刻所指,是值得中學語文老師重視與關注的。對于這一點,筆者將在日常的語文教學中不斷實踐、不斷積累、不斷豐富從而不斷提升自己的教學水平。
參考文獻
[1] 曹文軒:《動物小說:人間的延伸》[J],兒童文學研究,1997(01)。
[2] 沈石溪:《斑羚飛渡》,杭州:浙江少年兒童出版社,2010年8月。
1目前我校在動物醫學專業本科生畢業論文指導中存在的主要問題
一直以來,我校動物醫學院院辦與教師對畢業論文環節是非常重視的,組織到位、學時保證、程序完整,但也存在著諸多問題,比如說,科研認識不足、實驗設計不合理、實驗缺乏創新、科研經費不足、專業指導老師缺乏、學生認識不足、論文答辯把關不嚴等。如何面對這些問題,解決這些問題,是我們當今教學改革當中的重要課題。下面就我院本科畢業論文指導中存在的一些問題進行闡述。
1.1畢業論文選題不恰當
選題是本科畢業論文的基礎環節,它在一定程度上決定了畢業論文的質量。受實驗條件、指導老師自身能力、學生自身素質限制,選題缺乏創新性、實用性、可行性和范圍和深度不當等問題普遍存在。選題要么過大,學生無所適從,不知從哪著手。要么過小,研究的范圍過窄,過于深奧,學生理解困難。要么缺乏創新,完成的畢業論文水平一般。要么完全停留在基礎理論知識上面,缺乏實際操作動手能力。
1.2實驗設計不合理
畢業論文設計方面,一些水平較高,從事科研教學工作多年的專業老師工作繁忙,沒有時間或不愿意來進行本科生畢業論文的指導工作,專業老師指導有限,有的老師缺乏科研和實踐經驗,導致實驗設計不合理,以至于實驗進行到中途開展不下去了,不得不重新再來,既浪費了時間,又打擊了學生的積極性。
1.3實驗經費不足
動物醫學專業本科論文,整個實驗對經費要求比較高,學院投入的經費緊張或不足,經費按人頭算,分配不公,沒有與論文完成質量掛鉤,挫傷了認真帶學生的教師的積極性,也助長了部分不負責任教師的不正之風。這些都直接影響到論文完成的速度和質量。經費不足是本科畢業論文設計過程中的一個普遍的問題,往往前期一切進展順利,學生在進行一項很有意義的實驗的時候,到了中途或結尾,由于經費預算不足,這樣導致了實驗的質量大打折扣。指導的學生多,指導老師的科研經費緊張,畢竟實驗經費充足的老師不多,大多數老師經費少,對于講師來說更是負擔不起現在高昂的實驗費用。
1.4專業指導老師缺乏
指導畢業論文的師資力量薄弱存在于農科院校的許多專業中,動物醫學專業畢業論文(設計)是以動物養殖的實驗為主,論文指導所花的精力和時間很多。近年由于擴招,每個老師所帶的學生數量急劇增加,由于許多指導教師同時又要兼顧教學和科研任務,有的在校外任職,或經常出差,作為教授還指導研究生,繁重的教學任務以及其它原因導致專業老師在論文指導上沒有足夠的時間投入,從而影響了畢業論文的質量。有的指導老師不嚴格要求學生,缺乏對學術研究的嚴謹。
1.5學生對畢業論文不重視
畢業論文是大學階段專業學習情況的綜合體現,最能反映大學生的理論素養、思辯能力、基礎知識和創新精神。但是,現實中許多大學生并不重視做論文,不愿開展科學研究,經常以時間緊為借口參與實驗研究的時間偏少。科研意識和科研精神的匱乏,使不少人抱著應付的態度,知識缺乏積累,也就難以去完成高質量的論文。同時畢業論文質量把關不嚴,論文答辯及評審走過場,評分標準過低,這些都直接影響了學生對畢業論文的重視程度。上頭把關不嚴,下面敷衍了事,畢業論文的質量自然也好不到哪里去。
1.6論文寫作基本功不扎實
本科教學沒有設論文寫作方面的課程,學生對論文寫作的格式,方法及技巧知之甚少,有的時候實驗完成了,論文資料收集整理得差不多了,就是無從下手,不知該如何動筆,最后只好依葫蘆畫瓢,各種投機取巧的心理也滋生了。其實論文寫作是很講究的,這需要我們的專業老師在課堂上一一講解以及實驗論文寫作過程中加以耐心指導。
1.7畢業論文時間安排不合理
現在的畢業論文設計及操作都安排在第七學期末和第八學期初,而這時恰是同學們找工作、考研或考公務員的時間,與做畢業設計時間沖突,現在的社會大學生畢業就業壓力大,尤其是對于農林院校畢業的學生。由于找工作和考研對同學們來到說是最重要的兩件事,且都與畢業論文無太大關系,權衡利弊后,大部分學生必然選擇前者,以至于畢業生都無法安心去認真查閱資料,認真地去做畢業論文設計、實驗操作及后來的論文寫作。從而導致了論文“拼湊”、“摻水”現象嚴重,質量下滑,而且弄虛作假和形式主義傾向嚴重。
2提高我校動物醫學專業本科生畢業論文質量的指導措施
針對以上問題,我們立足高校,共同探討擴招后本科畢業論文質量的保障措施。提高本科畢業論文的改革對策,在對本科畢業論文的現狀和存在問題調查基礎上通過從時間前移提高認識、加強選題指導、增加經費、嚴把論文答辯關從而有助于提高畢業論文質量。
2.1時間前移,提高認識
時間前移、認識到位是做好畢業設計的基礎。為了更好地解決就業與研究生復試對畢業設計質量帶來的沖擊,我們應該在第七學期結束前一兩個月就開始布置畢業設計工作,指導教師下達任務,學生可以利用第七學期以及寒假期間查找資料,爭取讓學生在下學期開學前就對本課題已經有了一定的了解。而到下學期時,學生就可以直接進入實質性的研究工作。
此外,最好是將畢業論文設計貫穿于整個本科教育過程。組織從事教學、科研方面的骨干教師,結合自己的研究方面,吸收各年級中優秀學生一起參加,導師不定期的向這部分學生提供畢業設計選題,供他們選擇。這樣學生不僅可以鍛煉自己,提高實驗動手能力,而且有更多的時間來查閱資料,提高解決問題的能力,使得他們在學習之余有充裕的時間去完成高質量的畢業設計。
2.1.1學生方面
學生是學習的主體,只有讓學生認識到畢業設計對其能力的培養、知識的儲備、綜合素質的提高和社會適應能力的增強有重要意義,他們才會盡可能地排除各種干擾,在時間和精力上有更大的投入。
2.1.2教師方面
指導教師的工作態度和認真程度對畢業設計的質量有至關重要的作用,可以通過制定對指導教師的監督管理機制來發揮這一作用。
2.2加強選題指導
加大對畢業論文的選題指導,使選題具有科學性、實踐性、綜合性和創新性。為提高本科畢業論文選題質量,應加大對畢業論文選題的指導力度、控制每位教師指導的畢業生數量。
2.3增加經費
學校在加大本科生畢業論文管理的同時,對本科畢業論文也要有一定的經費支持。不僅要增加投入學生的實驗經費,還要加強實驗室和實習基地建設,使他們有動手實踐的空間。
2.4嚴把論文答辯關
醫學期刊論文的統計學質量是醫學研究科學性與嚴謹性的重要標志,但目前國內高水平醫學期刊的論文中統計學誤用和濫用問題卻較為普遍。本文總結了《山東醫藥》近年來中的統計學問題,就其中實驗設計、統計分析方法選用、數據表達等方面作一些分析與討論,希望能引起各位專家學者和臨床醫生的共識與重視,促進我國醫學期刊質量的提高。
1.實驗設計方面存在的問題
實驗分組僅從專業角度考慮問題,未從統計學角度考慮問題。作者僅從專業上想如何設計分組,而沒有想到其涉及的實驗因素以及每個因素包含的水平,組與組之間是否具有可比性等一系列問題。
1.1不遵循或不重視隨機化原則隨機化是科研設計的重要原則,直接影響研究結果的可信度。隨機化既要隨機抽樣,還要隨機分組,并有足夠的樣本量作前提。然而,在醫學論文中許多作者對此不夠重視,主要表現在論文中統計處理隨機化不突出,隨機化缺失情況比較常見,有的論文甚至將隨機誤解為隨意、隨便,不采用隨機化處理方法,導致結果缺乏可靠性。還有些文章中沒有提出“隨機”抽樣的設計與方法,沒有排除標準,給人隨意選擇病例之感,且病例數少,因此沒有代表性,所得出的結論不可靠。部分文章雖然注明了“隨機”,但未提及采取什么方法進行隨機化研究或兩組間的例數相差甚遠,不符合隨機化的一般規律,沒有臨床參考價值。
1.2缺少對照研究或對照組設計不合理正確設立對照是臨床研究的一個核心問題,設立對照的意義在于說明臨床試驗中干預措施的效應,減少或防止偏倚和
機遇產生的誤差對試驗結果的影響。目前,國內許多期刊發表的論文對照組設計不合理現象比較普遍,尤其有些作者對某種新藥或新技術在臨床的應用觀察研究中,不設對照組,缺乏對照觀察,得出的結論缺乏科學性,令人懷疑。有的文章雖然設立了對照組,但在分析結果時,卻沒有將試驗組與對照組的結果進行比較,而僅將各組間的自身前后進行比較,從而使該研究失去對照意義。
對照組選擇不當,還表現在兩組間重要的臨床特征和基線情況相差太大,無可比性,如性別、年齡、病情、經濟情況和文化程度等不一致,如有些論文將健康人或志愿者作為對照組,使結果受到非處理因素的影響,產生偏倚或系統誤差,使結論不可信。
1.3均衡性原則掌握不夠均衡性原則要求實驗中的各組之間除處理因素不同外,其他可控制的非處理因素要盡可能保持一致。特別對疾病預后有重要影響的臨床特性一定要在組間分布均衡。各組間越均衡,可比性越強。有些作者在對病例進行分組時,忽視了均衡性原則,兩組之間沒有可比性,結論自然是錯誤的。具體表現在:有的文章對治療組與對照組的相應統一指標沒有設在均衡的水平上。對治療組情況交代的比較詳細,而對對照組的年齡、性別、病情等不予交代,或所選對照組的年齡與治療組不在一個年齡段,影響了作者對指標的觀察。
2.統計分析方面存在的問題
統計方法選擇非常重要,它直接影響結論的可靠性。臨床資料的結果變量可分為計數資料、計量資料和等級資料。計數資料指將觀察對象按兩種屬性分類,
如生存、死亡,治愈、未治愈,有效、無效等,通常轉化為率。如果是兩組間的比較,則采用四格表x2檢驗或其校正公式,如果是多組間率的比較,則采用行X列表資料x2檢驗。計量資料指對某一個研究對象用定量的方法測定某項指標得到的資料,一般均有計量單位。通常資料呈正態分布時,兩組間均數比較用t檢驗,多組間均數比較用方差分析和q檢驗。當資料不呈正態分布或方差不齊時,也可用秩和檢驗等非參數檢驗法。
2.1統計方法描述不清,結論欠科學文中未交代所用統計方法,如是配對設計的t檢驗還是成組設計的t檢驗,是Ridit分析還是x2檢驗,是作相關分析還是作回歸推斷。統計方法交代不清或根本不予交代,使讀者對論文結論的正確與否無法判斷。有的作者只提一句“經統計學處理”后,就寫出結論。有的甚至直接用P值說明問題,籠統地以P<0.05或0.01、p>0.05便稱結果差異有無顯著性,值的大小不說明差值的大小,它還與抽樣誤差大小有關[5]。因此,還應寫明具體的統計方法,如有特殊情況,還應說明是否采用了校正,應寫出描述性統計量的可信區間,注明精確的統計量值和P值,然后根據P值大小作出統計學推斷,并作出相應的醫學專業結論。
2.2假設檢驗方法和結果的表達不交代假設檢驗方法或假設檢驗方法交代的不具體、不清楚是醫學科研論文中常見的錯誤。如果不交代假設檢驗方法或假設檢驗方法交代的不具體.讀者就無法考察論文的統計學方法選擇的是否正確,無法核對計算結果是否準確。每一種假設檢驗方法都有其特定的適應條件和嚴格的適用范圍。對于同一組資料,采用不同的假設檢驗方法可能得出截然相反的結論。如將配對設計的資料按成組設計資料的方法處理,將會損失樣本提供的信息、降低檢驗效率,可能使原本有統計學意義的結果無統計學意義。
任何反應都伴隨著能量的變化,通常表現為放熱或吸熱,所以溫度對化學平衡移動也有影響。
改變溫度,若平衡向正方向移動,反應物的轉化率增大;若平衡向逆方向移動,反應物的轉化率減小。
1.對于焓增加反應,即吸熱反應(H>0),升高溫度,平衡向右移動;降低溫度,平衡向左移動;
2.對于焓減小反應,即放熱反應(H<0),升高溫度,平衡向左移動;降低溫度,平衡向右移動;
(在改變溫度情況下,平衡右移,反應物轉化率提高,生成物轉化率降低;左移則反之。)
這是因為在升溫時,吸熱反應比放熱反應速率增加得快,降溫時吸熱反應比放熱反應速率減小的多的緣故。
二、壓強改變,對反應物轉化率的影響
改變壓強,若平衡向正方向移動,反應物的轉化率增大;若平衡向逆方向移動,反應物的轉化率減小。
例:N2(g)+3H2(g)2NH3(g)
此反應前后氣體的體積(即物質的量)有改變,若減小容積,即加壓,平衡向正方向移動,反應物N2和H2的轉化率增大;若增大容積,即減壓,平衡向逆方向移動,反應物N2和H2的轉化率減小;若在恒溫恒容下充入惰性氣體,即壓強增大,但對于N2,H2和NH3來說濃度沒有改變,所以速率不變,平衡不移動,反應物的轉化率也不變化。
例:H2(g)+I2(g)2HI(g)
此反應前后氣體的體積(即物質的量)沒有改變,無論是增大容積(減壓)還是減小容積(增壓),I2,H2和HI的濃度變化相同,速率變化也相同,平衡不移動,反應物I2,H2的轉化率不變;若在恒溫恒容下充入惰性氣體,即壓強增大,但對于I2,H2和HI來說濃度沒有改變,所以速率不變,平衡不移動,反應物的轉化率也不變化。
在其他條件不變的情況下,增大反應物的濃度或減小生成物的濃度,都可以使化學平衡向正反應方向移動;增大生成物濃度或減小反應物濃度,平衡向逆反應方向移動。
三、加入反應物,對反應物轉化率的影響
在恒溫恒容下:
1.若只有一種反應物時,加入反應物,相當加壓;減小反應物,相當減壓,平衡的移動依據勒夏特列原理分析即可。
例:aA(g)bB(g)+dD(g)
在恒容下,加入A,開始平衡向正方向移動,但達到的新平衡點與原平衡點比較:
若a=b+d,新平衡與原平衡等效,A的轉化率不變。
若a>b+d,新平衡向正方向移動,A的轉化率增大。
若a<b+d,新平衡向逆方向移動,A的轉化率減小。2.若反應物有多種時
例:mA(g)+Nb(g)pC(g)+qD(g)
(1)若增大A的量,平衡向正方向移動,B的轉化率增大,A的轉化率減小;若增大B的量,平衡向正方向移動,A的轉化率增大,B的轉化率減小。
(2)若按原比例同倍數增加A和B的量,相當在加壓,
若m+n=p+q時,新平衡與原平衡等效,A和B的轉化率不變。
若m+n>p+q時,新平衡向正方向移動,A和B的轉化率增大。
若m+n<p+q時,新平衡向逆方向移動,A和B的轉化率減小。
(3)若A和B的量不按原比例加入,分析何者增大倍數較大,則相當單獨加入了這一物質,同a分析即可。
例:N2(g)+3H2(g)2NH3(g)
原充入量1mol4mol達平衡后
又加入1mol1mol
增加倍數1倍1/4倍
經分析相當只加入了N2,則H2的轉化率上升,N2的轉化率降低。
通過不同條件下對反應物轉化率的討論,我們清楚平衡向正方向移動,反應物的轉化率不一定升高。
四、化學平衡移動的應用
1.判斷物質:由于壓強的改變,根據平衡移動的方向,可以判斷反應物或者生成物的狀態。
2.判斷系數:由于壓強的改變,根據平衡移動的方向,可以判斷方程式中反應物和生成物之間的計量系數的大小關系。
3.判斷反應熱:由溫度的改變,根據平衡移動的方向,可以判斷正反應或逆反應是放熱還是吸熱。
4.判斷轉化率:根據條件改變對化學平衡的影響,可以判斷達到新的平衡時某反應物轉化率的提高或降低。
研究化學平衡的目的并不是為了保持平衡狀態不變,而是為了利用外部的條件的改變,使化學平衡向有利的方向移動。
關于化學平衡移動原理的應用范圍和局限性,學生應明確:
1.平衡移動原理對所有的動態平衡都適用,為以后將要學習的電離平衡、水解平衡作鋪墊;
2.平衡移動原理能用來判斷平衡移動的方向,但不能用來判斷建立新平衡所需要的時間,所以學生在應用原理時應注意原理的適用范圍。
參考文獻:
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[2]經懷德.化學平衡中的哲學原理[J].合肥師范學院學報,2008(6).
前言
在體育教學中,糾正錯誤動作不是單一的練習方法的問題,而是方法、態度、情緒、以及與學生交談方式等等諸多方面都要考慮的一個綜合性問題,下面就是我提出對糾正錯誤動作的方法,以及在糾正錯誤動作過程能夠中應注意問題。
1.預防和利用體育教學中的錯誤
錯誤在學生學習體育技能過程中是經常發生的,其中一些錯誤是可以預防和利用的。這里我就談談錯誤的預防和利用方法。
1.1巧用示錯、加深記憶
體育教學中,教師在進行直觀師范時,為使學生對正確動作有深刻認識,從而達到預防可避免錯誤的效果,可有意做學生易犯的錯誤動作,學生結合自己做練習時就會結合自己出現的錯誤加以糾正從而達到預防的目的。
1.2正誤比較、加深體會
在訓練學生某種能力時,將正確與錯誤的動作交織起來示范給學生為學生提供選擇,從而溝通錯誤與正確間的聯系,促進轉化,減少或避免錯誤動作的發生。
1.3嘗試錯誤動作、促進思維
教學中避免學生出錯,使學生學得既快又好,是教學的目的也是教師的心愿。但實際上教學過程中,難免會出現各種各樣的錯誤,有時通過學生自己對技術動作的嘗試與分析也能受到較好的效果。
2.糾正錯誤時應注意的幾個問題
在體育教學中,我們往往會發現學生在學習中發生的一些錯誤是在所難免的,其中有些錯誤,不是僅僅只采用練習方法就能完全解決的問題。而這些錯誤我們怎樣去解決,這就要求我們具體問題具體地去對待。
2.1分析原因、以點帶面
學生學習動作時,有部分學生會在各技術環節都出現錯誤動作,但是其程度有輕有重。因此,在糾正錯誤動作時,不能只看到動作表象,必須認真分析錯誤動作產生的主要原因。找出原因后必須以最突出的錯誤動作為“重點”,以“重點”錯誤動作為突破口,解決了“重點”錯誤動作,其它與之有關的不明顯的錯誤動作也可隨之而改。
2.2針對特點、抓住時機
通常在學生學習動作技能的初期,大多數學生或多或少都有一定錯誤動作。此時不應急于糾正。即使是需要糾正時,應盡量以集體形式糾正,不能過多地點名糾正,否則使學生產生自卑消極情緒。
2.3注意語言的運用和表達
糾正錯誤動作應注意語言的運用,不能只簡單地說出錯誤的表象,也不能一概簡單地說“錯了”或“不對”,在一定的場合、時間,用簡單的語言指出錯誤動作,可以起到提示學生的作用,實踐證明,生動形象的語言能激發學生的想象,思維活躍,有助于錯誤動作的糾正。
3.糾正不同學生錯誤時要注意對話方式
作者:張洪友 曲永利 李祥輝 那璐 王春仁 單位:黑龍江八一農墾大學教務處 黑龍江八一農墾大學動物科技學院
開展畜牧獸醫綜合性技能訓練的條件
“雙師型”教師是開展綜合性技能訓練的前提動物醫學專業的特點就是實踐性強,這就需要任課教師既要具有普通高等教育教師資格,又要具有指導學生進行畜牧生產、動物疾病診斷和治療的能力。也就是既有理論講解能力,又有實踐動手能力。這就是大家通常所說的“雙師型”教師。學生想有一碗水,教師則至少有一桶水,甚至是一缸水,因此,擁有一批“雙師型”畜牧獸醫專業的任課教師是開展綜合性技能訓練的前提。基于這個條件,黑龍江八一農墾大學動物科技學院為動物醫學專業應用本科配備的授課教師均是專業理論扎實,具有多年實踐經驗的教授或副教授,這為畜牧獸醫綜合性技能訓練的順利開展提供了人才保障。科學合理的實踐教學計劃是開展綜合性技能訓練的基本保障由于畜牧獸醫綜合性技能訓練是將動物生產與疾病診治多門課程的相關實驗聯系在一起的綜合訓練,實驗教學計劃是否合理直接關系到學生專業實踐技能的掌握程度。為此,從2006年該校招收應用本科生以來,就聘請動物科技學院資深的專業教師成立實踐教學培養方案制定小組,根據應用本科人才實踐教學培養的要求,制訂切實可行的實踐教學大綱和具體的實踐教學實施方案。實施方案課程設置合理,前后順序銜接流暢,知識體系完整,通過幾年的教學實踐,基本上能夠滿足動物醫學專業應用本科生的培養要求,這為該校畜牧獸醫綜合性技能訓練的順利開展提供了基本保障。完善的實驗條件是開展綜合性技能訓練的基礎良好的實驗儀器設備、配套的實驗場地是順利開展綜合性技能訓練的基礎,沒有這些條件的支持,技能訓練猶如無根之水,無本之木,教學效果大打折扣。為了給綜合技能訓練提供良好的硬件設施,該校每年均投入大量資金用于實驗室建設,特別是動物醫學省級重點實驗室、動物醫學基礎實驗省級教學示范中心的建設,使學生的畜牧獸醫綜合性技能訓練順利進行。另外,校內實習基地———動物疾病診療中心已成為該校動物醫學專業的綜合實踐場所,每年可接收60~80名學生在此實習。該中心擁有國內一流的動物疾病診斷設備,實驗室條件完善,并擁有各種動物正常及病理標本,便于學生從書本中學到的知識馬上就可以在動物疾病診療中心進行實踐。配套的優質實訓教材是開展綜合性技能訓練的理論指南良好的技能訓練需要配套的優質實訓教材進行指導,為此,該校應用技術學院組織具有豐富臨床經驗的副教授和教授們編寫了《畜牧獸醫專業綜合技能實訓教材》,2006年由東北林業大學出版社出版。該實訓教材具有內容針對性強、實驗步驟清晰、目的明確、方法準確、操作合理等優點。2006年以來已在動物醫學專業應用本科使用,成為了畜牧獸醫綜合性技能訓練的理論指南。
開展畜牧獸醫綜合性技能訓練取得的成效
教師實踐教學能力得到進一步加強,成為真正的“雙師型”教師雖然在選擇給應用本科生任課的教學均為有豐富實踐經驗的教師,但是因為這些教師均為動物科技學院教師,一直給普通本科生和研究生上課,比較注重理論研究。現在給應用本科生上課,對教師提出了新的要求,那就需要有較強的實踐動手能力。因此,學校和教師本人都非常重視對實踐經驗的積累,學校有計劃地組織教師深入牧場、動物醫院、藥廠等地進行社會實踐,教師本身也經常到基層,去接觸新的養殖技術和疾病診斷方法,這樣,使教師實踐教學能力得到了進一步加強,真正成為了“雙師型”教師。學生的實踐動手能力顯著提高,畢業生就業率名列前茅動物醫學專業應用本科學生通過開展綜合性技能訓練,有效地提高教學質量,調動了學生自主學習和探索新知識的積極性,實踐動手能力明顯提高。因為該校對應用本科生采取的是“3+1”人才培養模式,即3年的理論學習,1年的生產實踐。學生們在最后的1年實習中,基本上掌握了動物常見疾病的診斷方法,能在農場或獸醫院獸醫的指導下開出處方,并獨立進行動物治療。這些學生成為了養殖場和動物醫院的重要人選,而且企業或動物醫院非常愿意選擇這些學生留下工作,這樣縮短了畢業生上崗的“后熟期”,滿足了企業的人才需求。該校動物醫學專業2010屆和2011屆畢業生的就業率均在97%以上,在4個應用本科專業中名列前茅,企業對畢業生的工作能力也非常滿意。提高實驗動物的利用率,節省實驗經費以前學生實驗是以課程來安排的,每門課程均獨立進行,需要單獨的實驗動物,這樣就造成了實驗動物的極大浪費。現在采取綜合性技能訓練,將多門課程的多個實驗組合在一起,提高了實驗動物的利用率,節省了實驗經費。例如,動物醫學課程中的《普通畜牧學》(包括養牛、養豬、養羊、養雞等)《動物解剖學》《動物病理解剖學》《獸醫診斷學》《獸醫內科學》《獸醫外科學》《獸醫傳染病學》《獸醫寄生蟲學》等課程均需要實驗動物,《獸醫微生物學》《獸醫衛生檢驗學》均需要采集病料,這些課程均單獨進行,需要大量的實驗動物,造成實驗動物的嚴重浪費。現在的綜合性技能訓練,首先進行的是普通畜牧學內容,進行外貌評定、豬的體尺測量及體重估測、屠宰指標測定、豬肉品質測定,然后采集血液、尿液、糞便進行微生物學、診斷學、寄生蟲學實驗,依次對動物進行臨床診斷、內科檢查、外科手術、解剖學和病理解剖學觀察、傳染病檢驗、內臟寄生蟲檢查,最后取肌肉或器官進行獸醫衛生檢驗。這樣,對一個動物就可以進行多項實驗,既提高了學生專業知識的綜合能力,又節約了實驗經費。
1.1創新性醫學論文的創新性是指文章要有新意,要發展醫學成就,破解醫學問題。醫學論文有無創新,選題是關鍵。選題創新是醫學論文寫作的靈魂,是衡量醫學論文價值的重要標準。可體現在:①理論方面的選題應有創新見解,既要反映作者在某些理論方面的獨創見解,又要提出這些見解的依據;②應用方面的選題應有創新技術等,也就是要寫出新發明、新技術、新產品、新設備的關鍵,或揭示原有技術移植到新的醫學領域中的效果;③創新性還包括研究方法方面的改進或突破。
1.2可行性所謂選題的可行性,是指能夠充分發揮作者的綜合條件和可以勝任及如期完成醫學論文寫作的把握程度。選題切忌好高鶩遠,脫離實際,但也不應過低,影響主客觀的正常發揮,降低了醫學論文的水平。影響選題的可行性因素有:①主觀條件,包括作者知識素質結構、研究能力、技術水平及特長和興趣等;②客觀條件,包括經費、資料、時間、設備等。
1.3實用性撰寫醫學論文的目的是為了交流及應用。要從實際出發,選擇夠指導科研、指導臨床、造福人類的主題,因此,選題的實用性尤為重要。
1.4科學性醫學論文是臨床和醫學科學研究工作的客觀反映,其寫作的具體內容應該是取材客觀真實、主題揭示本質、科研設計合理、論證科學嚴謹、表達邏輯性強、經過實踐檢驗。所以,嚴格遵守選題的科學性原則,是醫學論文寫作的生命。
1.5前瞻性要選擇有研究價值及發展前途的主題,應積極開發研究新領域、新學科和新理論。
2選題的基本方法
2.1根據課題研究的結論來確定主題這是常用的方法,可分為:①以科研的結論或部分結論作為醫學論文的主題;②科研結果與開題時預測不一致,待查出原因后,再尋找主題;③科研達不到預期結果,可總結經驗,從反面挖掘主題。
2.2在科研過程中選題醫學科研的過程中,有時會出現意外的現象或問題,作者如果能夠細心觀察、及時發現,可以在這些偶然中獲得新的選題。
2.3在臨床實踐中選題臨床工作是醫學論文寫作取之不盡的源泉,作者在臨床中會經常遇到許多需要解決的實際應用問題或理論問題,對此,只要從本學科實際出發,用心思考,會從中產生很多好的主題。其包括:①探討發病機制與預后情況;②分析臨床癥狀與表現;③研究診斷方法和治療方法;④疾病的多因素分析等。
2.4從文獻資料中選題醫學文獻是人們長期積累的寶貴財富,是醫學論文選題的重要來源。閱讀最新文獻資料,可以了解當前醫學科學研究的進展情況,開拓思路、激發靈感,從而挖掘提煉出好的醫學論文主題。
3醫學論文的一般體裁
3.1實驗研究一般為病因、病理、生理、生化、藥理、生物、寄生蟲和流行病學等實驗研究。主要包括:①對各種動物進行藥理、毒理實驗,外科手術實驗;②對某種疾病的病原或病因的體外實驗;③某些藥物的抗癌、抗菌、抗寄生蟲實驗;④消毒、殺蟲和滅菌的實驗。
3.2臨床分析對臨床上某種疾病病例(百例以上為佳)的病因、臨床表現、分型、治療方法和療效觀察等進行分析、討論,總結經驗教訓,并提出新建議、新見解,以提高臨床療效。
3.3療效觀察指使用某種新藥、新療法治療某種疾病,對治療的方法、效果、劑量、療程及不良反應等進行觀察、研究,或設立對照組對新舊藥物或療法的療效進行比較,對比療效的高低、療法的優劣、不良反應的種類及程度,并對是否適于推廣應用提出評價意見。
3.4病例報告主要報告罕見病及疑難重癥;雖然曾有少數類似報道但尚有重復驗證或加深認識的必要。
3.5病例(理)討論臨床病例討論主要是對某些疑難、復雜、易于誤診誤治的病例,在診斷和治療方面進行集體討論,以求得正確的診斷和有效的治療。臨床病理討論則以對少見或疑難疾病的病理檢查、診斷及相關討論為主。